Wejściówka 2

 0    98 fiche    grupa1cmbydgoszcz
laste ned mp3 Skriv ut spille sjekk deg selv
 
spørsmålet język polski svaret język polski
Ludzie hetero-czy mono zygotami i jak długi jest ich łańcuch genowy
begynn å lære
są heterozygotami oraz mają dłigośc 1/500 pz
SNP
begynn å lære
single nucleotide polymorphism
CNV
begynn å lære
copy number variation
HGP
begynn å lære
human genome project
pozbawienie zwierzęcia doświadczalnego określonego genu
begynn å lære
knockout genowy
genomika porównawcza
begynn å lære
porównawcza analiza różnych genotypów
proteomika
begynn å lære
wiedza o zespołach białek wytwarzanych przez komórki, tkanki, narządy
transkryptomika
begynn å lære
badania regulacji ekspresji genów na poziomie transkrypcji
Rekombinacja DNA in vitro jest możliwa dzięki?
begynn å lære
enzymom restrykcyjnym Endonukleazy
Gdzie znaleziono Endonukleazy?
begynn å lære
Znalezione jedynie w komórkach bakterii i sinic
Czemu zapobiegają Endonukleazy u bakterii i sinic?
begynn å lære
Zapobiegają włączenie obcego DNA do genomu bakterii
Jaką długość ma sekwencja zwykle rozpoznawana przez Endonukleaze?
begynn å lære
specyficzna sekwencja dwuniciowego DNA ma zwykle długość 4-8 par zasad
Aktywność „star” Endonukleaz co oznacza?
begynn å lære
Oznacza to ze trzeba zwrócić uwagę na warunki oznaczone przez producenta gdyż b uzyskać oczekiwany efekt trzeba przeprowadzić reakcje w warunkach podanych przez producenta
w jakiej długości światła są wykrywane zasady aromatyczne
begynn å lære
światło o długości 260 nm
w jakiej długości światła są wykrywane Białka
begynn å lære
światło o długości 280 nm
Od czego zależy współczynnik ekstrakcji
begynn å lære
od długości badanej cząsteczki
Absorpcja największa jest dla czego a najmniejsza dla czego
begynn å lære
Absorpcja największa dla nukleotydów a najmniejsza dla dsDNA
Hipochromizm
begynn å lære
Mniej barw
DsDNA o stęż 1mg/ml - A260
begynn å lære
20
RNA i ssDNA - A260
begynn å lære
25
Co ma wyższy współczynnik ekstrakcji puryny czy pirymidyny
begynn å lære
Puryny mają wyższy współczynnik ekstrakcji niż pirymidyny
Co powoduje topnienie (ogrzewanie)
begynn å lære
40% wzrost absorbancji
Co powoduje szybkie ochładzanie?
begynn å lære
minimalny spadek absorbancji
Co powoduje wolne ochładzanie?
begynn å lære
absorbancja bez zmian
Co daje Wektor
begynn å lære
zdolność do izolacji od gospodarza i replikacji
Co daje wektor Fag λ
begynn å lære
klonowania większych fragmentów
Co daje wektor H13
begynn å lære
klonowania fragmentów jednoniciowych
Co to kosmid
begynn å lære
plazmid + fag λ
Episomalne plazmidy
begynn å lære
wektory dla drożdży
Plazmid Ti
begynn å lære
dla roślin
Biblioteki DNA
begynn å lære
zbiory sklonowanych przypadkowo fragmentów genomu DNA/cDNA
Mapowanie restrykcyjne
begynn å lære
analiza fragmentów klonu po cięciu restryktazami
Komórki kompetentne
begynn å lære
czyli takie, które są zdolne do przyjęcia obcego DNA przez działanie na nie jonami Ca2+, Mn2+ i Rb2+
Transformanty
begynn å lære
przechowywane są najpierw w płynnej pożywce z antybiotykiem (selekcja) a następnie zamrażane z glicerolem (nie tworzą się kryształy) → tzw. zapas glicerolowi
Co pozwala odnaleźć polarność klonów cDNA
begynn å lære
Rejon kodujący
W czym są umieszczone polarne startery?
begynn å lære
Są umieszczone w postaci oligo(dT)
Polarne startery są komplementarne do?
begynn å lære
poliA
W klonach genomowych jakie mamy geny?
begynn å lære
Nie wiadomo od razu gdyż obecność genów nie jest oczywista
W klonowany genomach wiemy o jego polarności?
begynn å lære
Nie za bardzo gdyż polarność nie jest oczywista w klonowanych genach
Hybrydyzacja i mapowanie pozwana nam określić?
begynn å lære
Organizowanie klonowanych genów
na podstawie czego przygotowuje się Sondy
begynn å lære
na podstawie Southerna części sekwencji cDNA
Co można wykazać na podstawie Sondy przygotowanej metodą Southerna?
begynn å lære
Można określić która część klonu genomowego zawiera sekwencje komplementarne do sond.
Mapowanie za pomocą nukleazy S1:
begynn å lære
Identyfikacja końca 3’/5’ - hybrydyzacja transkryptu z dłuższym antysensownym fragmentem na jednym końcu Usuwanie fragmentów jednoniciowych - poddanie hybryd działaniu nukleazy S1 Określanie wielkości pozostałych dwuniciowych fragmentów - elektroforeza
Wydłużanie startera
begynn å lære
Starter jest wydłużany przez polimerazę dopóki nie osiągnie końca matrycy Następnie dochodzi do oddysocjowania polimerazy Długość wydłużonego fragmentu wskazuje na koniec 5’ matrycy
Retardacja żelowa
begynn å lære
Zmieszanie ekstraktu białkowego ze znakowanym fragmentem DNA Rozdział mieszaniny w niedenaturującym żelu poliakryloamidowym Ujawniają się kompleksy DNA-białko w postaci prążków retardacyjnych (opóźnionych)
Technika „odcisku stopy” z udziałem DNazy I
begynn å lære
Technika „odcisku stopy” z udziałem DNaz på polsk
„Odcisk stopy” białka związanego specyficznie z sekwencją DNA Może zostać ujawniony poprzez działanie małą ilością DNazy I na mieszaninę DNA i białka poddaje się analizie elektroforetycznej
Geny reporterowe
begynn å lære
Łatwo wykrywalne geny,
W jakim celu przyłącza się geny reporterowe?
begynn å lære
W celu zidentyfikowania funkcji jakiegoś promotora
Po przyłączeniu geny reporterowego co się bada
begynn å lære
Bada się ilość powstałego produktu białkowego
Jak określimy ważność poszczególnych sekwencji?
begynn å lære
poprzez dokonywanie progresywnych delecji DNA z jednego końca
Co pozwala uzyskać jednokierunkowe delecje?
begynn å lære
Egzonukleaza III - Usuwa kolejne nukleotydy w kierunku 3’→5’, gdzie koniec 3’ w dwuniciowy DNA jest cofnięty w stosunku do 5’
łączenie fragmentów sekwencji
begynn å lære
Powstałe cząsteczki poddaje się ligacji
Mutageneza ukierunkowana?
begynn å lære
Uzyskiwanie zmian jednego lub kilku nukleotydów w określonym miejscu sekwencji
Jak przeprowadza się mutagenezę
begynn å lære
W tym celu wykorzystuje się przyłączanie mutagennego startera i syntezę komplementarnego DNA z użyciem polimerazy DNA
Mutageneza dawniej
begynn å lære
Dawniej - jednoniciowe matryce przygotowane z użyciem wektorów M13
Mutageneza obecnie
begynn å lære
Obecnie - matryce otrzymane metodą PCR
Cel mutagenezy metodą PCR
begynn å lære
amplifikacja fragmentów DNA od strony 5’ lub 3’
Zastosowanie klonowania
begynn å lære
Wytwarzanie: zrekombinowanego białka, GMO, „odcisku DNA”, przygotowywanie zestawów diagnostycznych, terapie genowe
Jak powstaje zrekombinowane białko
begynn å lære
może być produkowane dzięki wprowadzeniu genu rzadko występującego białka do plazmidu i poddanie ekspresji w bakteriach, gdy krytycznym etapem jest modyfikacja potranslacyjna, gen może być poddany ekspresji w kom. eukariotycznych
Jak powstaje GMO
begynn å lære
powstaje poprzez wprowadzenie obcy gen do komórki, z której można zregenerować cały organizm
Jak powstaje „Odcisk DNA”
begynn å lære
hybrydyzacja, przeniesionego metodą Southerna, genomowego DNA z sądami, które rozpoznają proste powtórzenia nukleotydów prowadzi to do otrzymania obrazu, który jest unikatowy dla danego osobnika i może być stosowany do jego identyfikacji.
Terapia genowa - próby skorygowania genetycznych zaburzeń przez wprowadzenie do organizmu pacjenta prawidłowej kopii genu
begynn å lære
próby skorygowania genetycznych zaburzeń przez wprowadzenie do organizmu pacjenta prawidłowej kopii genu
Czystość DNA
begynn å lære
A260/A280 = 1,8 -czyste DNA A260/A280 < 1,8 -zanieczyszczone białkiem A260/A280 > 1,8 -zanieczyszczone RNA
Wirowanie izopikniczne
begynn å lære
To inaczej równowagowe wirowanie w gradiencie stężeń chlorku cezu
Co umożliwia Wirowanie izopikniczne
begynn å lære
Umożliwia analizę DNA i jego oczyszczanie
Co z RNA i białkami podczas wirowania izopiknicznego?
begynn å lære
RNA w dół, białka flotują = unoszą się
elektroforeza mikrokapilarna
begynn å lære
z wykorzystaniem macierzy
elektroforeza kapilarna
begynn å lære
w wolnym buforze, niewielkie cząsteczki, w cienkiej kapilarze kwarcowej
elektroforeza w żelu poliakrydynowym
begynn å lære
5-1000 pz (gRTPCR)
elektroforeza W żelu agarozowym
begynn å lære
0,1 -20 kpz
elektroforeza W polu pulsacyjnym
begynn å lære
20kpz - 10 Mpz (oddziela cząsteczki wielkości 100 kpz!)
Choroba Takahary = alaktazemia
begynn å lære
Gen kontrolujący syntezę katalazy - krótkie ramię chromosomu 11 - 11p13
Mechanizm Choroba Takahary = alaktazemia
begynn å lære
redukuje aktywność katalazy
objawy Choroba Takahary = alaktazemia
begynn å lære
Owrzodzenia śluzówek jamy ustnej, podudzi oraz wczesne wypadanie zębów
gdzie najczęsciej występuje Choroba Takahary = alaktazemia
begynn å lære
Najwyższa częstość występowania mutacji w Japonii
Dziedziczenie Choroba Takahary = alaktazemia
begynn å lære
autosomalnie recysywnie
Wrażliwość na chlorek suksametonium -
begynn å lære
zwiotczenie mięśni, efekt szybki ale tez szybko znika(za hydrolizę sukcynylocholiny odpowiedzialnej za objawy odpowiada cholinoesteraza- jej gen na 3 chromosomie i tam mutacja)
Hipertermia złośliwa
begynn å lære
przez leki znieczulenia ogólnego: antyestetyki, zwioty, glikozydy naparstnicy. Wzrasta napięcie mięśni prążkowanych, drżenie mięśniowe, tachykardia, wzrost temp. ciała (1C w ciągu 5 min) Mutacja 19q13.1
Alaktazemia
begynn å lære
gen 11p13, autosomalna recesywna
Metabolizm alkoholu etylowego- 2 enzymy
begynn å lære
dehydrogenaza alkoholowa ADH (chromosom 4) i dehydrogenaza aldehydowa ALDH (1-chromosom 9, 2-chromosom 12) Najczęściej u Azjatów
Porfirie
begynn å lære
porfiryny to prekursory hemu i składniki enzymów: wątrobowe i erytropoetyczne. Deficyty enzymów biorących udział w przemianach porfiryn. OPP=> wątrobowe. Autosomalnie dominująco.
Krzywica oporna na wit D3
begynn å lære
gen VDR dominująco w sprzężeniu z chromosomem X
Niedobór dehydrogenazy glukozo-6-fosforanowej
begynn å lære
chromosom X
Niedobór alfa-1-antytrypsyny
begynn å lære
gen PI, chromosom 14,
Niedobór paraoksonazy
begynn å lære
gen PON1 na chromosomie 7 sprzężony z genem CFTR
Hemochromatoza
begynn å lære
gen HFE na chromosomie 6, autosomalnie recesywnie
Hipolaktazja
begynn å lære
3 allele na chromosomie 3
Fenyloketonuria
begynn å lære
autosomalnie recesywnie, 12q24.1
Co wywołuje ostrą porfirię?
begynn å lære
Leki (barbiturany, sulfonamidy, przeciwbólowe, antykoncepcyjne, antybiotyki, alkaloidy sporyszu, etanol), infekcje, głodzenie, duży wysiłek fizyczny.
Formy enolowe/ketonowe
begynn å lære
W pH obojętnym - ketonowa, w zasadowym - enolowa
Co to sonikacja?
begynn å lære
Działanie ultradźwiękiem o dużej intensywności na DNA co prowadzi do uszkodzenia DNA i zmniejszenia jego lepkości.
Podział zasad.
begynn å lære
Puryny: adenina i guanina (2 piescienie) Pirymidyny: cytozyna, tymina, uracyl (1 pierścień)
Liza alkaliczna (element minizolacji plazmidów)
begynn å lære
Metoda oczyszczania plazmidowego DNA z chromosomowego DNA i innych
Plazmidy
begynn å lære
Autonomiczne, pozachromosomowe elementy genetyczne W postaci kolistych/liniowych cząsteczek DNA
PCR - łańcuchowa reakcja polimerazy
begynn å lære
Do amplifikacji sekwencji DNA Z użyciem pary oligonukleotydowych starterów Każdy jest komplementarny do jednego końca docelowej sekwencji DNA Termostabilna polimeraza DNA powoduje wzajemne wydłużanie się ku sobie starterów
Etapy PCR
begynn å lære
Etapy: denaturacja (95°C), przyłączenie startera (55°C), polimeryzacja (72°C) Elementy wymagane: matryca, startery, bufory, enzym, Mg2+, dNTP
Startery PCR
begynn å lære
Startery: para oligonukleotydów o długości 18-30 pz i podobnej zawartości G+C
Enzymy PCR
begynn å lære
termostabilna (odporna na denaturację) polimeraza DNA np. Taq

Du må logge inn for å legge inn en kommentar.